胃蛋白酶的作用,胃蛋白酶的测试
在人体内不同的酶的作用是不一样的,胃蛋白酶就有着分解蛋白质的作用。那么,胃蛋白酶的作用有哪些?胃蛋白酶怎么测试?
胃蛋白酶的作用:
胃蛋白酶应保存在低温环境中(-20℃至-80℃),以防止其发生自降解。储存于pH值大于11的溶液中或对其进行还原性甲基化也可以有效防止自降解的发生;当pH值回到6时,胃蛋白酶的活性即可恢复。
胃内的消化主要是对蛋白质初步分解,胃蛋白酶具有分解蛋白质的作用,但从主细胞分泌出的胃蛋白酶是以无活性的酶原存在,必须依据胃酸激活并提供作用环境,因此盐酸激活胃蛋白质酶原、提供胃蛋白酶作用的酸性环境,是其助消化功能.胃蛋白酶原由胃底主细胞分泌,在pH1.5~5.0条件下,被活化成胃蛋白酶,将蛋白质分解为胨,而且一部分被分解为酪氨酸、苯丙氨酸等氨基酸。
测试方法:
取试管6支,其中3支各精密加入对照品溶液1ml,另3支各精密加入供试品溶液1ml,置37℃±0.5℃水浴中,保温5分钟,精密加入预热至37℃±0.5℃的血红蛋白试液5ml,摇匀,并准确计时,在37℃±0.5℃水浴中反应10分钟。立即精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,摇匀,滤过,取续滤液备用。另取试管2支,各精密加入血红蛋白试液5ml,置37℃±0.5℃水浴中保湿10分钟,
再精密加入5%三氯醋酸溶液5ml,其中1支加供试品溶液1ml,另1支加上述盐酸溶液1ml,摇匀,滤过,取续滤液,分别作为供试品和对照品的空白对照,照分光光度法(附录ⅣA)在275nm的波长处测定吸收度,算出平均值AS和A,按下式计算。
A×Ws×n 每1g含蛋白酶活力(单位)=As×W×10×181.19式中 AS为对照品的平均吸收度;A为供试品的平均吸收度;Ws为对照品溶液每1ml中含酪氨酸的量,μg;W为供试品取样量,g;n为供试品稀释倍数。
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